ক) সমলিপন উৎস সনাক্তকরণ (Recognition of the replication origin):
DNA অনুসূত্রের যে নির্দিষ্ট স্থান থেকে ক্ষারক জোড় হাইড্রোজেন বন্ধন মুক্ত হয়ে দ্বিতন্ত্রী DNA অণুর প্যাঁচ খুলে যাত সেই স্থানকে সমলিপন উৎস (Replication origin) বা সংক্ষেপে 'ওরি' (Ori) বলে। অধিকাংশ ওরি 300 নিউক্লিওটাই দৈর্ঘ্য বিশিষ্ট। ওরি অংশ থেকে দ্বিতন্ত্রী-এর অংশবিশেষ খুলে গিয়ে যে বুদবুদের সৃষ্টি হয় তাকে সমলিপন নেত্র বা আখিঁ (Replication eye) বলে। সমলিপন নেত্রের উভয় পার্শ্বে ক্ষারক জোড় খুলে গিয়ে ঐ স্থানে ''Y" আকৃতির একটি গঠন সৃষ্টি করে যাকে সমলিপন দ্বি-বিভক্তি বা Replication fork বলে। প্রকৃতকোষী জীবে ওরি থেকে এক পাশে Replication fork অগ্রসর হয় কিন্তু আদিকোষী জীবে তা উভয় পার্শ্বে অগ্রসর হতে থাকে। ওরি অংশে ১১টি (কখনো ১৪টি) নিউক্লিওটাইডের সুনির্দিষ্ট অনুক্রম থাকে। তবে বিভিন্ন অরি অংশের মধ্যে ২-৩টি নিউক্লিওটাইডের পার্থক্য লক্ষ করা যায়।
খ) মাতৃ DNA-র ঘূর্ণিযুক্তকরণ (Unwinding of the parent DNA) :
DNA অণুতে সমলিপন উৎস বা DNA ওরি সনাক্তকরণের সময় বেশ কিছু প্রোটনের উপস্থিতি লক্ষ্য করা যায়। এদেরকে প্রারম্ভিক প্রোটিন (Initiator protein) বলা হয়। প্রারম্ভিক প্রোটিন প্রথমে DNA অণুর ক্ষারক অনুক্রম (ওরি) সনাক্ত করে। উহার সাথে যুক্ত হয়ে জটিল প্রোটিন যৌগ
তৈরি করে। এ সময় দ্বিতস্ত্রীর (Double helix) 'ওরি'র ক্ষারক যুগল হেলিকেজ (DNA helicase) নামক এনজাইমের ক্রিয়ায় হাইড্রোজেন বন্ধন মুক্ত হয়। এই বিক্রিয়ায় যে শক্তির প্রয়োজন হয় তা ATP (Adenosine triphosphate) থেকে আসে।
খ) যুক্ত রিতন্ত্রী অংশকে পৃথক রাখা (Holding the unwinding double stands apart) : সমলিপন নেয় সৃষ্টি করে হেলিকেজ এনজাইম যখন সম্মুখ দিকে অগ্রসর হয় তখন Replication fork তৈরি হয়। হেলিকেজ এনজাইমের ক্রিয়ায় মুক্ত ক্ষারকসমূহ যাতে পুনরায় বন্ধন তৈরি করে মুক্ত হতে না পারে সেজন্য এক ধরনের প্রোটিন উক্ত অংশের সাথে যুক্ত হয় যেগুলো একক অণুসূত্র বন্ধনকৃত প্রোটিন (single stranded binding protein বা SSBP) নামে পরিচিত। একে Helix distabilizing প্রোটিন (HDP) নামেও অভিহিত করা হয়। SSBP এক ধরনের অতি ক্ষুদ্রাকৃতির প্রোটিন যার আণবিক ওজন ৩৫,০০০ এবং যা ১০টি নিউক্লিওটাইড নিয়ে গঠিত।
(ঘ) অপত্য DNA RNA প্রাইমার তৈরি (DNA সংশ্লেষণ সূচনাকরণ (Initiation of new DNA synthesis): Replication fork সামনের দিরে অগ্রসর হতে থাকলে পিছনে DNA সূত্রকদ্বয় আলাদা হয়ে থাকে তখন একে ছাঁচ বা Template জ্বলে। এই ছাঁচ দু'টির উপর নির্ভর করেই নতুন সূত্রকের সৃষ্টি হয়। RNA প্রাইমেজ (বর্তমানে DNA প্রাইমেজ) সক্রিয় হয়ে Template- উপর ওরি অংশ থেকে শুরু করে পরিপূরক রাইবোনিউক্লিওটাইড যুক্ত হয়ে স্বল্প দৈর্ঘ্যের RNA শিকল তৈরি করে যা প্রাইমার (Primer) নামে পরিচিত। এই প্রাইমারের দৈর্ঘ্য ৫০-১০০ নিউক্লিওটাইড DNA সংশ্লেষণের জন্য প্রাইমার অংশটি অতি প্রয়োজনীয়। কেননা DNA পলিমারেজ III (DNA pot. III) ফাঁকা জায়গায় DNA সংশ্লেষণ করতে অক্ষম। DNA সংশ্লেষণের জন্য এর একটি ৩'-হাইড্রোক্সিল (3'-OH) প্রান্তের প্রয়োজন হয় যা প্রাইমার সরবরাহ করে। প্রাইমেজ সরে যাবার পর প্রাইমারের শেষ থেকে DNA pol. III একটি পর একটি করে Template-এর ক্ষারকের পরিপূরক ডিঅক্সিরাইবোনিউক্লিওটাইড যুক্ত করে অপত্য DNA সংশ্লেষণ শুরু করে। DNA Pol. III কেবল 3'5' মুখী Template-টি সনাক্ত করতে পারে। তাই এটি 5'-3' মুখী নিরবচ্ছিন্নভাবে DNA সূত্রক সংশ্লেষণ করতে থাকে। DNA pol. III যখন Template-এর উপর নতুন সূত্রক সংশ্লেষণ করতে করতে সামনে অগ্রসর হয় তখন SSBP অণুসমূহও পর্যায়ক্রমে মুক্ত হতে থাকে।
Leave a Comment